酶联免疫斑点实验 (enzyme linked immunospot assay, ELISpot) 是一种在96孔板内的一百万个细胞中实现对单个分泌细胞进行定量检测的新型的免疫酶技术。灵敏度高,易操作,成本相对流式细胞术较低,已被广泛应用于癌症研究,疾病探索以及疫苗研发等领域。
ELISpot原理:将细胞置于包被有特异性抗体的96孔板中培养,在有刺激的条件下,细胞分泌的细胞因子或免疫球蛋白会被包被抗体捕获。移除细胞后,被捕获的细胞因子可进一步使用生物素标记的二抗来标识,其后再与酶标记的亲和素作用,并加入底物使其呈色,有反应作用的细胞会留下直径大小不等的染色斑点。
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